星期一, 四月 10, 2006

如何制备HiDi-Formamide

在100毫升塑料烧杯中用5毫升Sigma分生级甲酰胺(100毫升瓶装包装,储于-20°C)涡旋洗10克Bio-Rad AG501 X8离子交换树脂1分钟。用10毫升有刻度的吸量管吸出甲酰胺 ,对另外5毫升甲酰胺重复上述操作。将10毫升用过的甲酰胺移入合适的螺口容器,以化学废物处置。

向离子交换树脂加入余下的80毫升甲酰胺,盖以锡箔纸,室温连续摇2小时。

通过0.2微米筛真空过滤甲酰胺,除去树脂。

测量甲酰胺体积,并以以下公式,加入适量的200mM EDTA(pH8),使EDTA终浓度保持在0.3mM。

VEDTA(µl) = 1.5 x VForm(ml)

VEDTA :加入的 EDTA 体积(µl)。
VForm :测得的甲酰胺体积(ml)。

以1毫升的分装单位冷冻甲酰胺,储于-20°C。每次使用一只。融化的分装需存放于冰箱中。如融化2-3天内未使用,则抛弃。

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